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穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系的建立

本文主要介紹穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的原理、步驟，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠得到穩(wěn)定高表達的細胞株，是滿足活性蛋白大量制備的方法。利用哺乳動物系統(tǒng)生產(chǎn)蛋白的方式有兩種：瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。使用哺乳動物細胞表達蛋白，細胞的選擇培養(yǎng)也不可忽視。常用的有中國倉鼠卵巢細胞（CHO）和人胚腎細胞（HEK293）。德泰生物主要培養(yǎng)HEK293用于哺乳動物細胞瞬時轉(zhuǎn)染，CHO細胞用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染通過穩(wěn)定細胞系構(gòu)建篩選出能夠穩(wěn)定表達的細胞株。針對瞬時轉(zhuǎn)染，外源基因在短時間轉(zhuǎn)錄翻譯得到的蛋白量少，1mg質(zhì)粒得到1mg...

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細胞轉(zhuǎn)染：瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染效率影響因素

真核蛋白表達細胞轉(zhuǎn)染方式有兩種：瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，本文的主要介紹了兩者的定義和適用性及細胞轉(zhuǎn)染一般步驟，影響轉(zhuǎn)染效率的因素，幫助我們提高實驗的成功率。在哺乳動物細胞蛋白表達實驗，根據(jù)不同的實驗?zāi)康模瑢①|(zhì)粒導(dǎo)入細胞有兩種方法：瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。細胞轉(zhuǎn)染是將外源基因?qū)胝婧思毎倪^程。質(zhì)粒、DNA、RNA將這些外源基因?qū)氲秸婧思毎麅?nèi)并不容易，要跨越細胞膜的屏障進入細胞質(zhì)。瞬時轉(zhuǎn)染瞬時轉(zhuǎn)染是指外源基因?qū)氲郊毎蟮靡员磉_，但是基因不整合到細胞的基因組上，因此不會隨著細胞的生長...

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我們?yōu)槭裁匆X？

人的一生中約有三分之一的時間都在睡覺，睡眠是整個動物界生存所必須的過程。有研究表明，動物在醒著的時候會受到一定程度的神經(jīng)系統(tǒng)損害，由此產(chǎn)生的受損基因和蛋白質(zhì)，會在腦部堆積并引起疾病，而睡眠有助于修復(fù)這種損害并清除這些垃圾。也有實驗發(fā)現(xiàn)，睡眠可以促進與學(xué)習(xí)和記憶鞏固相關(guān)的神經(jīng)塑性重組及突觸的生長。但我們目前對于神經(jīng)修復(fù)和重組在睡眠期間的相對作用，以及其在個體發(fā)育過程中是否會發(fā)生變化仍不清楚。近日，來自英國帝國理工大學(xué)、美國加利福尼亞大學(xué)以及德克薩斯大學(xué)的研究團隊在《Scienc...

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你可知美國R&D Systems試劑盒性能的重要性！

美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面，并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，美國R&DSystems試劑盒盒又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。美國R&DSystems試劑盒性能的重要性:①靈敏度：反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒，如果待檢...

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美國R&D Systems試劑盒在進行操作時有什么需要注意的要點呢？

R&DSystems擁有近30,000種產(chǎn)品，95%以上由自己研發(fā)生產(chǎn)。其產(chǎn)品包括細胞因子、ELISA試劑盒、生長因子、趨化因子、抗體、Animal-Free?蛋白、Luminex液相芯片、多因子檢測固相芯片、流式細胞分析與細胞篩選、干細胞及細胞培養(yǎng)等；覆蓋腫瘤、發(fā)育、糖生物、內(nèi)分泌、免疫、神經(jīng)學(xué)、蛋白酶、信號傳導(dǎo)等學(xué)科研究領(lǐng)域；且每年有近2,000種新產(chǎn)品不斷問世，以滿足不同科研工作者的研究需要。美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表...

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